【EmStat3Blue电化学应用】基于靶向诱导AIE效应结合CRISPR/Cas12a系统的双信号生物传感,用于超灵敏检测胶霉毒素
本文提出了一种新型的快速、超灵敏的电化学生物传感器,用于靶向诱导激活AIE效应和Crispr Cas12a (LbCpf1)的无差别剪切功能,实现双信号检测胶霉毒素。构建的DNA传感单元包含适配体、ssDNA-Fc和Activator1。在本系统中,激活模式分为两个步骤。首先,当靶标与适配体相互作用时,DNA传感单元迅速分解启动链转移反应,释放出大量Ac1,通过AIE效应聚集ETTC-dsDNA产生荧光信号。其次,ETTC-dsDNA在聚集过程中释放Ac2,激活LbCpf1的无差别剪切功能,极大地提高了ssDNA-Fc的剪切效率,实现了体系的信号放大和对靶标的超灵敏检测。利用该方法检测胶霉毒素,电化学信号检测限低至2.4 fM,在50 fM~1 nM范围内具有良好的线性关系,检测时间缩短至55 min,解决了以往传感器电化学信号弱的缺点。同时将不溶于水的AIE材料与DNA偶联得到水溶性ETTC-dsDNA,并成功引入水介质传感系统,作为荧光响应信号,检测限低至5.6 fM。研究结果表明,通过结合手持式电化学工作站,该传感器成功应用于5种实际样品中的胶霉毒素的检测,检测范围可达到32.0~2.09×108pM。该方法不仅为复杂食物基质中真菌毒素的检测提供了一种新颖有效的检测平台,而且为分子成像和疾病诊断领域开辟了一条有前景的途径。
原文链接:https://doi.org/10.1021/acs.analchem.3c01760
本文中进行电化学测试的仪器为荷兰PalmSens,型号:EmStat3Blue便携式电化学分析仪,由雷迪美特中国有限公司提供。