2022-3-16-15:03

【MultiEmStat电化学应用】基于CRISPR技术驱动电化学微流控多路生物传感器,应用于无靶扩增的miRNA诊断

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亮点


  • 首次报道一种微流控多路CRISPR生物传感器;

  • 使用Cas13a展示了多个miRNA芯片检测原理的论证;

  • 基于单通道和停止流原理来实现多路的功能;

  • 推导了“单通道多个分析物的生物传感器”设计规则;

  • 电化学CRISPR生物传感器X可同时检测多达8种核酸。


  最近,microRNAs(miRNAs)作为多种疾病的生物标记物,在临床和护理点诊断中具有重要意义。然而,在其他挑战中,它有一个核心要求,即必须在其他因素的背景下评估特定miRNA的浓度,以便明确诊断一种特定疾病。就诊断方法和设备的发展而言,这意味着不可避免地需要多路复用,以便能够并行测量患者样本中特定的多个指标。

  在这项研究中,本文中设计并实现了电化学微流控生物传感器的不同多路版本,方法是将其通道分为几个部分,在CRISPR生物传感器X上创建四种新型芯片设计,用于无扩增和同时定量多达八个miRNA(“X”突出了设备的多路方面)。然后,我们使用一步模型分析,随后进行电流测量,并结合2分钟停流方案,探索不同版本设备的流体和机械特性以及局限性。该传感器表现出最佳性能,随后被用于Cas13a动力概念验证测量来自miRNA-17–92簇的两个miRNA(miRNA-19b和miRNA-20a),这在儿童髓母细胞瘤患者的血液中是失调的。后者的量化以及同步阴性对照测量在同一设备上完成,因此,确认了此平台适用于无扩增、并行检测多种核酸的挑战。

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原文链接:https://doi.org/10.1016/j.bios.2020.112887

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文章中所用的电化学分析仪为荷兰PalmSens;型号:MultiEmStat3(四通道)。

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